换一批摘要[目的]克隆野生型虫荧光素酶(luciferase)基因(Luc)全长序列并对其进行生物信息学分析.[方法]以虫荧光素酶报告栽体pXP2 DNA为模板,应用PCR技术,获得萤火虫Luc基因目标条带并克隆到pGEM-T-Easy载体,利用CD search、ProtParam、ProtScale和SOMPA等11种预测软件对其保守区域、一级结构、理化性质、空间结构及活性区域等进行预测分析.[结果]该酶由551个氨基酸残基组成,属于可溶性亲水蛋白.其二级结构主要由无规卷曲和α-螺旋组成.三级结构以6q2m.1的A链为模板进行同源建模,其活性区域由125个氨基酸残基构成,面积和体积分别为2 483.879(A)2和1 834.454 (A)3.在该蛋白质的活性区域之外,筛选出38个具备引入二硫键条件的潜在位点.[结论]成功克隆了Luc基因,并对野生型虫荧光素酶进行了生物信息学分析预测,为进一步过定点突变提高虫荧光素酶的热稳定性奠定了理论基础.
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栏目名称
DOI
10.16519/j.cnki.1004-311x.2020.04.0053
发布时间
2020-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
2018年度安徽省卫生计生委科研计划项目（(“虫荧光素酶的定向进化研究”,2018YK006)）
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