RABVG蛋白一号表位抗体IgM改造提升生物学活性
IgM engineering of antibodies targeting the first epitope of RABVG protein enhances biological activity
摘要[目的]将狂犬病病毒糖蛋白(RVGP)上3种针对不同类型表位的单克隆IgG抗体改造为IgM工程化抗体,对改造前后针对不同类型表位抗体的效力学差异进行探究.[方法]通过质粒构建将不同类型表位的单克隆IgG抗体进行IgM工程化改造并表达纯化.通过ELISA和RFFIT检测了改造前后抗体亲和力、中和活性以及二者变化的相关性,检测了不同病毒MOI下改造后的IgM抗体抑制病毒的效力变化.[结果]纯化出3种IgM工程化抗体,经鉴定,针对1号线性表位改造后IgM亲和力变大,EC50由0.598 5 μg/mL降至0.064 8 μg/mL,中和活性由32.43 IU/mg升至842.97 IU/mg,且在高浓度病毒下该抗体仍具备较好的中和活性.三种抗体改造后亲和力变化与中和活性变化具有相关性(P<0.05).[结论]针对RVGP的1号线性表位IgM工程化改造能够提升抗体的生物学活性,亲和力、中和活性分别提升了 9.24倍、25.99倍,且改造前后亲和力与中和活性变化呈线性相关.
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