一株高产杀虫蛋白苏云金杆菌的生物学特性研究以及其aiiA基因的克隆和生物信息学分析
Biological Characteristics of Bacillus thuringiensis Strain BRC-PC6 and Cloning, Bioinformatics Analysis of its aiiA Gene
摘要在细菌群体密度(quorum-sensing,简称QS)系统中由苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)的aiiA基因所编码的胞内解酯酶AiiA蛋白对AHLs信号分子N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones)的浓度响应,从而决定了许多动、植物病原菌致病基因的表达.本研究由生物农药厂周边环境中分离得到一批Bt菌株,其中有1株BRC-PC6在发酵过程中可产生大量杀虫晶体蛋白.以库斯塔克亚种HD-1为对照,对该菌株生理生化反应、杀虫基因、蛋白质图谱等生物学特性进行了研究,并对其aiiA基因进行了检测、克隆和比对测序,以期更好地研究aiiA基因在不同来源的苏云金芽胞杆菌中的分布,并对其进行分子改造.结果表明,该菌株含有cry1Aa、cry1Ac等活性基因,主要对鳞翅目幼虫具有较高毒力.所克隆的PC6-aiiA序列全长均为753 bp,目前已知的aiiA基因与其同源性较高,达88%~97%.生物信息学分析表明,该基因编码蛋白为不稳定疏水蛋白,含有1个结构域和信号肽序列.以已知结构的AiiA蛋白为模板,模拟构建了PC6-AiiA的三级结构,二者结构高度相似,这些结果为aiiA基因的深入研究提供了参考数据.
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