换一批摘要pSLT质粒是主要存在于鼠伤寒沙门氏菌株中的一种特异性毒力质粒,探讨了沙门氏菌pSLT毒力质粒水平基因转移(horizontal gene transfer,HGT)的可行性,及其对细胞坏死和凋亡的影响.采用λRed同源重组技术,将pKD46质粒来源的Kana抗性基因整合插入沙门氏菌的pSLT质粒中;以沙门氏菌(ATCC 14028)为供体菌,大肠杆菌(ATCC 25922)为受体菌,通过M9培养基平板接合法进行接合转移,获得的接合菌在含有卡那霉素的麦康凯液体培养基中进行产酸产气培养验证,划线培养取单菌落进行菌液PCR鉴定和测序鉴定比对;以人结肠癌细胞HCT116为肠道代表菌,将接合菌以感染复数(multiplicity of infection,MOI)100进行作用,通过流式细胞术检测细胞坏死和凋亡情况.结果发现,含有卡那霉素的营养琼脂平板上有单菌落生长,Kana抗性基因片段成功重组插入pSLT;接合菌在含有卡那霉素的麦康凯液体培养基中有产酸产气现象,pSLTKana质粒接合转移至大肠杆菌;与对照组相比,ATCC 25922处理组未造成Annexin V/PI双阳性细胞比例的显著变化(P>0.05),ATCC 25922 pSLT和ATCC 14028处理组均表现出显著降于Annexin V/PI双阳性细胞比例(P<0.01).通过构建ATCC 14028 pSLTKana重组菌株,证实了沙门氏菌携带的pSLT毒力质粒向大肠杆菌进行水平基因转移的可行性,ATCC 25922 pSLTKana对肠道细胞的坏死和凋亡存在潜在的抑制作用,为临床治疗和公共卫生安全监管提供了重要的科学数据和思路.
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栏目名称
DOI
10.19586/j.2095-2341.2025.0090
发布时间
2026-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
北京市科学技术研究院创新工程项目（25CA011）
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