摘要在基因克隆、基因功能和表达调控研究中,获得目的基因尤其是表达丰度低的基因全长cDNA仍然是一个技术难题.本文对近年来有关反转录过程中影响全长cDNA合成的因素与对策的研究进行了总结,特别对消除mRNA二级结构阻碍的方法及其效果、较高反应温度和金属离子对模板mRNA完整性的影响、RNA分子伴侣在反应温度不变的情况下改善cDNA第一链质量的效果等作了较为详细的介绍.此外,还介绍了确保具有完整5′端的cDNA进入后续研究的几种新方法.
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