摘要描述一种应用PCR技术定向引入DNA小片段和特异酶切位点的方法.为了获得m2/loxp66-EG-FP-loxp71基因片段.根据EGFP基因序列,设计一对特异引物,上、下游引物分别引入m2/loxp66、loxp71序列和Xhol、Mlul酶切位点.以pEGFP-N1质粒为模板,采用PCR扩增以合成DNA双链,插入到克隆载体pMD-18T.对重组子测序结果表明,实现了DNA小片段和酶切位点的定向引入.
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