换一批摘要从青海省羊源细粒棘球蚴提取基因组DNA,PCR扩增eggs基因并且克隆.测序结果表明该基因序列全长1 262bp,由2个内含子和3个外显子组成,3个外显子分别为70bp、306bp和95bp.因此,推测其ORF为471bp,编码156个氨基酸.用RT-PCR方法扩增该基因的ORF,经克隆、DNAstar比对分析序列,它与预测的ORF序列100%相同.将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-5x-1,构建重组表达质粒pGEX-5x-1-eg95,将其转入表达菌株BL21中进行原核表达.表达产物经过SDS-PAGE电泳分析,得到一条特异的蛋白条带;质谱鉴定证明表达的蛋白确实是eg95抗原蛋白;酶联接免疫吸附剂测定表明抗原抗体发生了特异性反应,进一步证明融合蛋白进行了正确表达,从而为囊型包虫病的研究奠定基础.
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