换一批枯草杆菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的诱导分泌表达
Induced Secretion Expression of Lipase Genefrom Bacillus subtili in Escherichia coli
摘要借助生物信息学对已克隆的枯草杆菌脂肪酶LipB2全长基因序列进行比对分析.结果显示该脂肪酶基因全长635 bp,编码包括31个氨基酸分泌型信号肽在内的211个氨基酸,与NCBI GenBank中已报道的枯草杆菌属脂肪酶核苷酸序列有94.0%的一致性.将该基因克隆到pET-28a(+)表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),利用枯草杆菌脂肪酶的信号肽序列进行了分泌表达.SDS-PAGE电泳显示分泌表达的脂肪酶分子质量约为21 kD.对表达条件优化后,在30℃、大肠杆菌菌液OD_(600)值为1 8、乳糖诱导浓度为1 5 mM、摇瓶发酵10 h后大肠杆菌分泌表达26 0 U/mL重组脂肪酶,相比较IPTG的诱导,既实现了脂肪酶的高效表达,又节省了成本.
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关键词
乳糖诱导IPTG诱导枯草杆菌脂肪酶基因分泌表达Induction of lactoseInduction of IPTGBacillus subtiliLipase geneSecretory expression
分类号
Q93（微生物学）
栏目名称
发布时间
2010-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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