大豆GmPDS基因的克隆及VIGS表达载体构建和鉴定
Construction and Identification of VIGS Expression Vector Carrying GmPDS Gene Cloned from Glycine max
摘要病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing, VIGS)技术是近年来发展起来的一种反向遗传学快速研究基因功能的方法,对于植物特别是难于转化的大豆而言尤其适用.本研究采用PCR技术从大豆(Glycine max)基因组中克隆了八氢番茄红素去饱和酶(phytoene desaturase,PDS)基因的部分序列,命名为GmPDS(Glycine max PDS).该片段长430 bp,序列分析表明,该基因与大豆八氢番茄红素去饱和酶(GenBank 登录号:M64704)cDNA序列同源性为99%.双酶切GmPDS片段和烟草脆裂病毒载体(pTRV2),构建了重组载体pTRV2-GmPDS,并将该重组载体分别转化农杆菌C58C1/pMP90、GV3101和LBA4404,为分析pTRV载体是否可以浸染大豆奠定了基础.
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