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GST pull-down验证流感病毒PB1-F2蛋白与热休克蛋白40的相互作用

Identification of Interaction between Influenza Virus PB1-F2 Protein and Heat Shock Protein 40 by GST Pull-down Assay

摘要为体外脸证流感病毒PB1-F2与热休克蛋白Hsp 40相互作用,通过两个方向的GST pull-down试验验证PB1-F2与Hsp40的相互作用.构建GST-多肽融合蛋白原核表达载体pGEX-6P-1-PB1-F2和pGEX-6P-1-Hsp40,并在大肠杆菌(E.co-li)BL21中诱导表达;构建真核表达载体pLEGFP-Hsp40及pCAGGS-PBI-F2,并分别转染293T细胞使其表达Hsp40及PB1-F2触合蛋白,然后进行GST pull-down试验验证二者的相互作用.成功地构建了两种蛋白的各种表达载体,经表达、纯化获得了可溶性的GST-多肽融合蛋白,GST pull-down试验正反两方向都证实了PB1-F2与Hsp40的相互作用,初步证实了流感病毒PB1-F2在体外能与Hsp40发生相互作用.

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2011年1期

202-207页

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