制备高效大肠杆菌电转化感受态细胞和电转化条件的研究

Preparation of Efficient Electrotransformation Competent Cells of Escherichia coli and Condition of Electrotransformation

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摘要旨在建立一种高效大肠杆菌电转化感受态细胞的制备方法,研究了摇瓶装液量,菌体生长阶段,转化电场强度,转化后复苏时间以及感受态细胞存放时间等对转化效率的影响.结果表明,基液量为400 mL/2L,菌体在OD600值为0.452时收集所制备的感受态细胞,在电场强度12.5 kV/cm条件下电击5 ms,转化后复苏时间2h,转化效率可达到1010CFU/μg DNA.此条件下制备的感受态细胞转化效率高,质量稳定,重复性好.

作者朱森康 ^[1] 黄磊 ^[2] 李燕飞 ^[3] 钟卫鸿 ^[4] 徐志南 ^[2] 学术成果认领

作者单位浙江工业大学生物与环境工程学院,杭州 310032;浙江大学化学工程与生物工程学系,杭州310027 ^[1] 浙江大学化学工程与生物工程学系,杭州,310027 ^[2] 浙江大学化学工程与生物工程学系,杭州310027;浙江工业大学药学院,杭州310032 ^[3] 浙江工业大学生物与环境工程学院,杭州,310032 ^[4]

关键词大肠杆菌电转化感受态细胞转化效率

主题词细胞(Cells)大肠杆菌(Escherichia coli)效率(Efficiency)研究(Research)时间(Time)

分类号 Q78

栏目名称

研究报告

发布时间 2011-12-23