换一批大豆血红蛋白基因lba转化根瘤菌工程菌株的构建
Construction of Genetic Engineering Strain of Introduction Glycine max Leghemoglobin Gene of lba into Native Rhizobium japonicum
摘要以土著大豆根瘤菌接种大豆幼苗45 d后获得的根瘤为材料,提取其总RNA并反转录成cDNA,采用同源序列克隆法扩增大豆血红蛋白基因lba编码区序列.利用DNA重组技术,将lba基因连到lac启动子的下游,利用带有发光酶标记基因luxAB的质粒载体pTR102构建表达载体pTR-Plac-lba.采用三亲本杂交的方式,将表达载体pTR-Plac-lba及作为对照的空载体pTR102分别转化土著大豆根瘤菌,获得根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-1ba)和SFH( pTR102).盆栽试验发现,接种SFH( pTR-Plac-lba)的大豆植株各生理指标明显高于接种SFH( pTR102)、土著根瘤菌以及未接菌的大豆植株各生理指标.试验证明,导入大豆血红蛋白基因lba的根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)对于提高大豆根瘤的固氮酶活性,增加大豆产量起到显著效果.
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