换一批
换一批摘要旨在克隆人生存素( survivin)基因,并在原核系统中进行可溶性表达.采用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MCF-7中克隆survivin基因,将其重组到pAYZ表达栽体中,构建带有六聚组氨酸纯化标记的人survivin基因原核表达栽体pAYZ-survivin,将该载体转化大肠杆菌16C9进行表达.结果表明,成功克隆了survivin基因并构建了重组表达载体.融合蛋白主要以可溶性状态分泌到周质腔内存在.分离提取蛋白,HiTrap金属螯合柱进行亲和层析纯化,并经Western blot验证了高纯度survivin融合蛋白的表达.
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主题词
大肠杆菌(Escherichia coli)生物医学工程(Biomedical Engineering)基因(Genes)蛋白(Egg White)克隆, 生物(Cloning, Organism)
分类号
R346
栏目名称
研究报告
发布时间
2012-09-20
基金项目
高等学校博士学科点专项科研基金
国家自然科学基金
天津市自然科学基金
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