换一批来源于假单孢菌206植酸酶基因的克隆、表达及酶学性质研究
Gene Cloning, Expression and Characterization of an HAP Phytase from Pseudomonas fluorescens 206
摘要从浙江嘉兴人工鱼塘底泥样品筛选到产植酸酶活性较高的假单孢菌(Pseudomonas fluorescens)206.通过简并PCR和TAIL-PCR技术从Pseudomonas fluorescens 206菌株基因组DNA中克隆得到一个新的编码组氨酸酸性植酸酶(HAP)的基因,命名为phyP.该基因ORF全长1 284 bp,编码了427个氨基酸和一个终止密码子,前24个氨基酸为信号肽.将phyP在大肠杆菌中表达,重组蛋白经硫酸铵分级沉淀和阴离子交换柱纯化后达到电泳纯.对其酶学性质分析表明:重组植酸酶PhyP最适pH为5.5,在pH3.5-7.5的条件下具有较好的稳定性;重组植酸酶PhyP最适温度为45℃,在25℃时也具有较高的酶活性,因此植酸酶PhyP在饲料行业,尤其是水产行业具有潜在的应用前景.
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