换一批人转录因子hASH4的表达纯化及其DNA结合活性
Expression,Purification and DNA Binding Activity of Human Transcription Factor hASH4
摘要hASH4蛋白所属的HLH转录因子家族在调节基因表达，调控细胞周期，决定细胞分化中起了重要作用。有研究表明hASH4蛋白可能与皮肤的分化发育有着密切的关系，但具体机制不明。成功构建了pET28b-hASH4表达质粒，并在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达。经过对温度、时间、IPTG浓度等表达条件的优化，确定在37℃下1 mmol/L IPTG诱导表达4 h可达到最佳表达效果，并通过亲和层析和弱阳离子交换层析纯化蛋白，得到了电泳纯的目的蛋白。通过非放射性凝胶滞留试验发现hASH4蛋白单体只具有非特异性的DNA结合活性，而不具有特异性的DNA结合活性，推进其在体内的转录因子功能可能需先形成异源二聚体或多聚体才能进一步特异性结合DNA进而作用于下游基因。研究结果为hASH4蛋白的功能和作用方式提供了线索，并为其进一步的结晶条件筛选、晶体结构解析和功能研究奠定基础。
更多相关知识
关键词
螺旋-环-螺旋碱性/螺旋-环-螺旋hASH4DNA结合特异性结合非特异性结合HLHbHLHhASH4DNA-bindingSpecific bindingNon-specific binding
医学主题词
转录因子(Transcription Factors)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)蛋白(Egg White)人(Persons)研究(Research)
栏目名称
发布时间
2014-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30770427）
国家重点基础研究发展计划（973计划）（973;2009CB825505）
- 浏览135
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
