换一批
换一批共表达内质网响应蛋白HAC1对α-半乳糖苷酶在毕氏酵母中表达的影响
Effect of Co-expressing Protein HAC1 on Expression ofα-galactosidase in Pichia pastoris
摘要为提高毕氏酵母（Pichia pastoris）中重组α-半乳糖苷酶的表达，将来源于P. pastoris GS115的hac1基因构建至pPIC9K表达载体中，转化到重组P. pastoris中与α-半乳糖苷酶共表达。研究结果表明，在AOX1启动子控制下，HAC1过表达提高了重组P. pastoris中α-半乳糖苷酶蛋白表达含量，使α-半乳糖苷酶活性提高了2.2倍。经PCR产物鉴定，结果表明重组P. pastoris基因组中插入hac1基因。经50 L发酵罐甲醇诱导168 h，Gal-HAC1-4#工程菌最终酶活达到6560 U/mL，比Gal-21#工程菌提高了27%。甲醇诱导后Gal-HAC1-4#发酵液中粗蛋白浓度均高于Gal-21#工程菌。表明共表达HAC1蛋白可提高毕氏酵母产α-半乳糖苷酶蛋白的能力。
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