换一批人组蛋白α-氨基乙酰基转移酶Nat11表达纯化、晶体生长及底物结合研究
Expression,Crystallization and Substrate Binding Studies of Human Histone N-terminal Acetyltransferase Nat11
摘要α-氨基乙酰基转移酶11（Nat11）催化组蛋白H4和H2A氨基端乙酰化修饰，发挥着重要的表观遗传调控功能。将人Nat11基因构建到原核表达载体pSUMO中，转化入大肠杆菌BL21（DE3）进行重组表达。通过镍柱亲和层析等一系列体外纯化步骤，获得高纯度Nat11。利用等温滴定量热法（ITC），测得Nat11与底物多肽微摩尔量级结合常数。利用质谱技术，发现纯化后的Nat11结合有大肠杆菌内源产生的乙酰辅酶A或辅酶A，在ITC滴定过程中可以产生对多肽底物的乙酰化修饰，表明纯化获得的Nat11在溶液中具有酶活力。随后，对Nat11进行晶体生长研究，通过初筛优化获得蛋白截短体及底物-酶融合蛋白单晶。
更多相关知识
关键词
α-氨基乙酰基转移酶11重组蛋白表达蛋白聚集酶-底物结合晶体生长Alpha-amino acetyltransferase 11Recombinant protein expressionProtein aggregationEnzyme-substrate bindingCrystallization
栏目名称
发布时间
2014-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
科技部“973”项目（(2011CB965303)）
:2012教育部新世纪优秀人才支持计划
- 浏览111
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
