换一批拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达条件的优化
Optimization of Prokaryotic Expression of Antibacterial Peptide hyastatin Gene in Scylla paramamosain
摘要旨在优化拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达条件.克隆拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因成熟肽片段,与pET-28a表达载体连接后,转入到大肠杆菌BL21(DE3)中,通过优化条件进行诱导表达.结果显示,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.2 mmol/L、37℃条件下培养4 h后表达量最大,分子大小与预期值相符.融合蛋白主要以包涵体形式高效表达,通过HisTrap HP柱子使其得到进一步纯化.Western blot分析表明,该融合蛋白可与鼠抗His-tag单克隆抗体发生特异性结合.说明通过优化表达条件,获得拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达表达产物.
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关键词
拟穴青蟹hyastatin基因原核表达条件优化Scylla paramamosainhyastatin geneprokaryotic expressioncondition optimization
栏目名称
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.020
发布时间
2015-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广西自然科学基金（2010GXNSFA013079）
广西壮族自治区科技攻关计划（1114012-11）
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