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新型鸭呼肠孤病毒RT-LAMP检测方法的建立

A RT-LAMP Assay for Detection of Novel Duck Reovirus

摘要建立适于基层实验室快速检测新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)的一步反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)方法。基于新型鸭呼肠孤病毒S3基因的6个保守区域设计了4条LAMP引物,利用Bst DNA聚合酶在63℃恒温保持45 min即可完成反转录和扩增反应,由此建立了RT-LAMP检测方法。该方法具有良好的特异性,除NDRV外对其他6种常见鸭病的检测结果均为阴性。该方法对病毒RNA的最低检出量为0.1 pg,是常规RT-PCR方法的100倍。临床应用结果表明,该方法与病毒分离鉴定方法的符合率为98%,而且对仪器的要求低,适于基层实验室和现场检测。

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作者 于可响 [1] 马秀丽 [1] 韩宏宇 [2] 刘存霞 [1] 李玉峰 [1] 黄兵 [1] 宋敏训 [1] 学术成果认领
作者单位 山东省农业科学院家禽研究所 山东省家禽疫病诊断与免疫重点实验室,济南,250023 [1] 山东省农业科学院家禽研究所 山东省家禽疫病诊断与免疫重点实验室,济南 250023; 山东农业大学动物科技学院,泰安 271018 [2]
栏目名称 技术与方法
DOI 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.08.011
发布时间 2015-09-08
基金项目
山东省海外高层次人才(泰山学者)引进计划,山东省现代农业产业技术体系家禽创新团队计划 公益性行业(农业)科研专项
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生物技术通报

生物技术通报

2015年8期

71-75页

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