换一批
换一批拟南芥SPX1蛋白原核表达及纯化分析
Prokaryotic Expression and Purification of AtSPX1 Protein in Arabidopsis thaliana
摘要包含SPX结构域的蛋白在高等真核生物中广泛存在，这类蛋白的功能多数还不太清晰，但发现有些与磷信号相关，有些与铁信号相关。拟南芥中含有SPX结构域的蛋白可分为4个家族，本研究中的拟南芥SPX1（AtSPX1）属于一个只含有SPX结构域的蛋白组成的家族，其它家族成员还包含额外的基因序列。进化树分析表明，AtSPX1编码的氨基酸序列与双子叶植物具有较高的一致性，与单子叶植物进化距离较远。为了揭示AtSPX1蛋白的结构形态与其生物学功能之间的联系，开展了AtSPX1蛋白质体外可溶性表达实验，构建了原核体外表达载体，在大肠杆菌（E.coli）细胞中获得了该蛋白可溶性高表达。表达的蛋白包含有His标签方便了蛋白纯化，插入的SUMO融合蛋白标签可以通过蛋白酶切除，而目标蛋白通过硫酸铵沉淀实现了纯化。进一步分子筛层析分析表明AtSPX1以单体形式存在。实验结果提供了一套表达纯化AtSPX1蛋白的有效方案。
更多相关知识
栏目名称
研究报告
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.08.013
发布时间
2015-09-08
基金项目
国家自然科学基金项目
浙江农林大学科研发展基金项目
- 浏览72
- 被引4
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
