苏云金芽胞杆菌chiA73基因的克隆、表达和酶活性分析
Cloning,Expression and Enzymatic Activities ofchiA73Gene from Bacillus thuringiensis
摘要旨在对苏云金芽胞杆菌几丁质酶基因进行分子鉴定和酶活测定,从产几丁质酶活力高的Bt DLD171菌株中提取基因组DNA,通过PCR法克隆得到几丁质酶chiA73基因(GenBank登录号为KJ508093)。结果显示,对chiA73基因进行表达,获得大小约74 kD的表达产物。用荧光底物对表达产物进行酶活测定,发现表达产物只能水解荧光底物4-甲基伞形酮几丁三糖[4- MU-(GlcNAc)3],而不能水解4-甲基伞形酮几丁单糖(4-MU-GlcNAc)。结果表明,ChiA73为一种内切几丁质酶,在pH值为8、温度为40℃时酶活性最高。
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