换一批黑曲霉C112纤维二糖酶基因的克隆与生物信息学分析
Cloning and Bioinformatics Analysis of Cellobiase Gene from Aspergillus niger C112
摘要以紫外诱变获得的高产纤维素酶黑曲霉C112菌株为模板,采用RT-PCR技术克隆黑曲霉C112的纤维二糖酶基因bgl(GenBank登录号:KP307454);该基因全长2 934 bp,含有非编码序列,编码860个氨基酸,等电点为4.70,核酸序列与数据 库的Aspergillus niger(GenBank登录号JX982101.1)同源性达到了99％;生物信息学分析表明,纤维二糖酶为具有一定亲水性的稳定酸性分泌蛋白;二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲为结构元件;该基因经IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明,重组表达产物的相对分子量约为93.3 kD,与预期相符;纤维二糖酶在大肠杆菌BL21中胞内融合表达,重组蛋白pNPG酶活为5.847U/mL,最适反应温度为50℃,最适pH值为5.0.
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DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.02.015
发布时间
2016-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
湖南省教育厅科学研究重点项目（13A123）
中南林业科技大学研究生科技创新项目（CX2014B30）
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