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莲藕根尖染色体制片与免疫荧光染色技术的优化

The Optimization of Chromosome Preparation and Immunofluorescence Staining for Root Tip of Nelumbo nucifera

摘要在细胞遗传学研究中,莲藕根尖染色体制片比较困难,研究了莲藕根尖染色体制片过程中适宜取材的根尖长度、有丝分裂指数、预处理试剂和处理时间、固定时间、酶解与低渗时间等相关因素,并对莲制片进行了免疫荧光染色。结果表明:根尖长为1.5 cm左右时有丝分裂指数最高,预处理采用冰水冷冻处理24 h分裂相较多,染色体形态清晰;用4%多聚甲醛固定1h,染色体形态较好;采用2.5%纤维素酶和2.5%果胶酶混合液37℃消化30 min,酶解较彻底,细胞质残留少,染色体分散良好;1×PBS低渗30 min,染色体形态较好;免疫荧光染色后经检测可观察到较强的信号。

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作者 王海燕 [1] 朱之轩 [2] 金晶 [2] 丁毅 [2] 学术成果认领
作者单位 新疆教育学院科学教育学院,乌鲁木齐 830043; 武汉大学生命科学学院遗传学系,武汉 430072 [1] 武汉大学生命科学学院遗传学系,武汉,430072 [2]
栏目名称
DOI 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.04.009
发布时间 2016-05-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家自然科学基金(31271310)
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生物技术通报

生物技术通报

2016年32卷4期

74-79页

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