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三疣梭子蟹nm23基因克隆及在卵巢发育中的表达分析

Cloning and Expression Analysis of Gene nm23 during Ovarian Development of Portunus trituberculatus

摘要Nm23基因编码的核苷二磷酸激酶(NDPK)参与调控生物体的多项生理功能,包括生长、发育、分化和肿瘤转移等。根据三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)转录组数据库中的nm23同源序列,利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)首次克隆获得了三疣梭子蟹nm23基因的全长cDNA序列(GenBank登录号:KP027331)。该序列全长777 bp,编码一个151个氨基酸的蛋白,该蛋白包含一个典型的核苷二磷酸激酶(NDPK)区域,具有NDPK活性位点和多肽结合位点。推导的氨基酸序列与已知甲壳动物的nm23一致性达到90%以上,与脊椎动物第一类nm23的一致性也达到70%以上。系统进化树分析发现第一类nm23与第二类nm23分别聚为一支,甲壳动物nm23属于第一类,且与nm23-1和nm23-2亲缘关系较近。采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术分析了三疣梭子蟹nm23的组织差异表达及其在卵巢发育过程中的表达水平变化,结果表明nm23在三疣梭子蟹各组织内均有表达,其表达水平在眼柄、肌肉和Y器中最高,卵巢和肝胰腺次之。在三疣梭子蟹卵巢发育过程中,卵巢中nm23的表达水平在Ⅰ期最高,之后随着卵巢发育的进行,其表达水平逐渐下降,并在成熟期降至最低,这表明nm23可能参与调控三疣梭子蟹的卵巢发育。

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DOI 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.04.012
发布时间 2016-05-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家自然科学基金(41376152,40976098) 浙江省自然科学基金(LY13C190006)
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生物技术通报

生物技术通报

2016年32卷4期

94-101页

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