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盐穗木金属硫蛋白HcMT在大肠杆菌中高效表达及金属离子结合能力的检测

High-level Expression of a Type 2 Metallothionein Protein(HcMT) from Halostachys caspica in Escherichia coli and Its Metal-binding Ability

摘要旨在研究盐穗木金属硫蛋白HcMT基因原核表达情况及结合金属离子的能力。从盐穗木中克隆获得的金属硫蛋白(HcMT)基因亚克隆至pGEX-6p-2原核表达载体上,在大肠杆菌BL21中表达,分离纯化融白蛋白GST-HcMT,通过原子吸收分光光度法测定融合蛋白GST-HcMT结合金属离子的量以判断其与金属离子的结合能力。结果显示,诱导表达的融合蛋白GST-HcMT分子量在34 kD左右,与预期一致,且通过Western blot进一步得到验证;原子吸收结果表明其具有结合Cu2+、Zn2+、Pb2+、Cd2+的能力,融合蛋白结合Cu2+、Zn2+、Pb2+、Cd2+的量分别是对照的25倍、10倍、4倍和2倍,其结合能力大小为Cu2+>Cd2+>Zn2+>Pb2+。

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2016年32卷4期

121-127页

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