换一批
换一批稳态和时间分辨荧光光谱法检测pBR322质粒中十字形结构
Steady-state and Time-resolved Fluorescence Spectroscopy to Detect the Cruciform Structure in pBR322
摘要在目的DNA不被酶切成不同片段的情况下，应用光谱方法探测pBR322质粒中十字形结构DNA的形成。吡咯脱氧胞苷（Pyrrolo deoxycytidine，PdC）取代dC掺入到pBR322质粒的特定位点（3195，3222或3281位点）。应用稳态和时间分辨荧光法研究十字形结构DNA的形成。结果显示：（1）稳态荧光特性表明，当PdC掺入到pBR322质粒的3222位点，PdC-pBR322超螺旋荧光强度大约是松弛型PdC-pBR322的4倍；与此同时，其时间分辨荧光寿命大约比松弛型PdC-pBR322长约0.3 ns。当PdC掺入到3195或3281位点时，稳态荧光光谱和荧光寿命（两位点处约1.42 ns）并没有显著变化。（2）随着盐浓度的增大，荧光寿命略微有变化，但不是很明显。通过检测和分析pBR322质粒的荧光光谱和荧光寿命，表明能够形成在非配对环状部分3222位点含有dC的十字形结构。在一定的盐浓度（0-100 mmol/L）条件下，十字形结构能够保持其稳定性。
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关键词
十字形结构pBR322质粒PdC稳态和时间分辨荧光光谱法cruciform extrusionpBR322 plasmidPdCsteady-state and time-resolved fluorescence spectroscopy
栏目名称
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.04.028
发布时间
2016-05-23
基金项目
江苏省六大人才高峰资助项目（swyy-030）
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