山药 Actin 基因片段的克隆及表达分析
Cloning and Expression Analysis of Actin Gene Fragment from Dioscorea opposite
摘要通过山药 Actin 基因的克隆和表达分析,为研究山药生长发育中肌动蛋白的作用及其他基因的表达和调控奠定基础。根据 GenBank 中已经公布的其他植物肌动蛋白基因(Actin)的保守序列设计一对简并引物,采用 RT-PCR 技术从山药块茎中分离出1个 Actin 基因 cDNA 片段,命名为 DoActin。片段长度为1091 bp,编码357个氨基酸,并提交 GenBank(登录号:KU669295)。与 NCBI 核酸和蛋白质数据库序列比对,该序列与其他植物 Actin 基因核苷酸序列的同源性均在83%以上,氨基酸序列的同源性均在97%以上。进化分析结果显示,DoActin 与海枣 Actin-2、木本棉 Actin-7的亲缘关系最近。实时定量 PCR 结果显示,DoActin 在山药叶片、地上茎和地下块茎以及不同发育期的块茎和叶片中表达量相对稳定,表明其适宜作为山药的内参基因。
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