肺炎链球菌 TCSs 中 WalR 的克隆表达、保守性及抗原表位分析
Clone and Expression of WalR in Streptococcus pneumonia TCSs and Analyzation of Conservation and Antigenic Epitope
摘要通过构建 PET28a-WalR 表达载体并在大肠杆菌 BL21中表达 WalR 重组蛋白,以评价其对 C57小鼠的免疫原性;并分析其在不同血清型肺炎链球菌中的保守性和 B 细胞的抗原表位。以肺炎链球菌 D39血清型 WalR 基因为模板,构建重组质粒PET28a-WalR 并转入 BL21诱导表达目的蛋白质。采用 ClustalX 2.1软件对 WalR 蛋白在不同血清型 S.pn 中的保守性进行分析;利用 DNASTAR 软件对其 B 细胞抗原表位进行分析。结果显示,成功构建 PET28a-WalR 重组表达载体,经 IPTG 诱导后有大量高纯度的目的蛋白质,但其主要以包涵体形式存在;WalR 蛋白在不同血清型肺炎链球菌中高达99.4%,其 B 细胞抗原表位可能位于9-16、35-42、95-111、113-135、150-161、200-218等氨基酸序列位点。成功获得大量以包涵体形式表达的肺炎链球菌 WalR 重组蛋白,并对其保守性和抗原表位进行了系统分析。
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