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基于数字 PCR 的转基因水稻 LL62品系精准定量检测方法建立

Establishment of Precisely Quantitative Method of Genetically Modified Rice LL62 Based on Digital PCR

摘要为了促进转基因产品标识制度的顺利实施，对未获我国农业部批准的转基因水稻 LL62品系进行精准定量检测方法研究，以保障我国进出口转基因农产品的检测监管。基于转基因水稻 LL62品系外源插入片段和水稻基因组 DNA 的3'端旁侧序列设计数字 PCR 检测体系，建立了精准定量检测方法。结果显示，设计的引物探针反应效率高，基于此建立的数字 PCR 方法高度特异于转基因水稻 LL62品系检测；方法可重复性好，生成微滴数相对标准偏差（RSD）值介于0.60%-11.11%；准确度高，3个混合样品（10%、1%和0.1%）测定值与真实值之间的偏差（bias）分别为0.12、0.09和0.10，相对标准偏差（RSD）介于0.09%-10.31%。建立的转基因水稻 LL62品系微滴数字 PCR 定量检测方法简便快捷、特异性强、重复性好、准确度高，可准确有效地对农产品和食品中转基因水稻 LL62成分进行精准定量分析。