换一批摘要旨在构建大鼠 NKx6.1启动子的报告载体，验证转录因子 T3R 对 NKx6.1启动子的调控活性。用 PCR 扩增大鼠脑组织 NKx6.1的5'上游启动子片段2.4 kb，应用生物信息学方法预测该片段上潜在的转录因子 T3R 结合位点，根据不同的结合位点作系列截短，获得3段长度不等的启动子缺失片段，分别克隆到荧光素酶报告基因表达质粒（pGL3-Basic）上，构建相应的报告载体。将报告载体和 T3R 共转染大鼠星形胶质细胞（rat astrocytes，RA），并检测报告基因荧光素酶的活性。结果显示，成功构建大鼠 NKx6.1启动子报告载体，双荧光素酶报告基因活性检测表明 T3R 对 NKx6.1启动子有明显调控作用，其中-1887 bp-1507 bp 活性最高，即存在关键顺式调控元件。克隆并筛选出启动子核心区域，揭示了甲状腺激素对大鼠 NKx6.1的表达调控机制。
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关键词
同源盒基因 NKx6.1甲状腺激素双荧光素酶报告检测启动子活性homeobox gene Nkx6.1thyroid hormonesdual-luciferase reporter assay systempromoter activity
医学主题词
大鼠(Rats)荧光素(Fluorescein)甲状腺(Thyroid Gland)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)基因, 同源盒(Genes, Homeobox)
栏目名称
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.08.017
发布时间
2016-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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