换一批水稻白叶枯病菌 c-di-GMP 受体 Clpxoo 关键结合功能位点的确定
Identification of Critical Residues in c-di-GMP Receptor Clpxoo from Xanthomonas oryzae pv. oryzae
摘要旨在确定水稻白叶枯病菌（Xanthomonasoryzaepv.oryzae，Xoo）c-di-GMP 信号受体 Clpxoo 的关键功能位点。通过对 Clpxoo 蛋白氨基酸位点基因突变，表达载体构建、蛋白诱导表达及其 Ni-NTAResin 亲和层析，进行了 Clpxoo及其点突变蛋白的原核表达和产物纯化；通过等温滴定量热法（ITC），检测了 Clpxoo及其点突变蛋白与 c-di-GMP 的结合作用。利用基因定点突变和桥接 PCR 方法，在优化的诱导表达和纯化条件下，成功地获得了 Clpxoo 点突变蛋白和与 c-di-GMP 不发生结合的 Clpxoo 点突变体。结果表明，Clpxoo 蛋白第70位天冬氨酸和第99位谷氨酸是与 c-di-GMP 结合的关键功能位点。
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关键词
水稻白叶枯病菌c-di-GMP信号受体蛋白点突变体结合作用Xanthomonas oryzae pv. pryzaec-di-GMPsignal receptor proteinpoint mutantbinding affinity
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DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.12.020
发布时间
2016-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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