换一批
换一批基于四环素调控系统的叶绿体启动子在大肠杆菌中活性检测
Activity Detection of Chloroplast Promoter Based on Tetracycline Regulatory System in Escherichia coli
摘要旨在研究四环素调控系统在叶绿体基因工程中调控启动子活性.以四环素基因及四环素特异性识别序列的核心操控区为基础,首先合成带有四环素核心操控区的prrnO1O2启动子,通过酶切连接的方法连接到表达载体Bio3-GFP,并在大肠杆菌中验证该启动子的活性.结果表明,在该启动子的驱动下GFP基因表达使菌落呈明亮绿色;构建四环素诱导下GFP基因的表达载体Bio3-TetR-prrnO1O2-GFP,筛选出适应大肠杆菌生长的最高四环素使用浓度为5μg/mL;然后构建四环素调控系统下的GFP表达载体,在未加入四环素时,prrnO1O2启动子的功能被抑制,加入四环素后,GFP基因表达出绿色荧光蛋白.说明利用四环素调控系统可以在大肠杆菌中控制叶绿体启动子prrnO1O2的活性,从而避免了核基因组对质体基因组的调控干扰,为进一步利用质体基因工程育种提供有效的方法和途径.
更多相关知识
关键词
四环素调控系统叶绿体启动子prrnO1O2大肠杆菌tetracycline regulatory systemchloroplastpromoterprrnO1O2Escherichia coli
栏目名称
研究报告
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.02.022
发布时间
2017-04-10
基金项目
国家自然科学基金项目
云南省应用基础研究计划项目
- 浏览104
- 被引1
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
