换一批
换一批产O-乙酰高丝氨酸的大肠杆菌构建与发酵测试
Construction and Fermentation Testing of an O-acetyl-homoserine Producing Escherichia coli Strain
摘要O-乙酰高丝氨酸(OAH)是具有潜在工业应用价值的前体化合物,可用于制备高丝氨酸与蛋氨酸等.以一株改造自苏氨酸产生菌的Escherichia coli ThrL为出发菌株,过表达OAH合成途径中的关键酶高丝氨酸脱氢酶基因thrA和高丝氨酸乙酰基转移酶基因metX,并利用不同强度的启动子组合优化这两个基因的表达水平,通过发酵培养基中的苏氨酸和酵母粉的浓度优化以提升OAH的产生菌株的生产性能.通过启动子组合优化结果发现,当thrA与metX均采用J23110启动子时,该重组菌株E.coli OAH4的OAH合成能力最强,摇瓶发酵50 h后,其OAH产量为1.54 g/L.当苏氨酸的浓度为2 g/L,酵母粉的浓度为6 g/L时,E.coli OAH4的发酵水平最高,摇瓶发酵50 h后,OAH的产量可进一步提升至1.98 g/L.本研究首次在E.coli中实现了OAH的合成,并通过发酵优化确定了OAH的最优发酵条件,为后续OAH生产应用研究奠定了基础.
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关键词
大肠杆菌O-乙酰高丝氨酸天冬氨酸激酶I/高丝氨酸脱氢酶I高丝氨酸乙酰基转移酶发酵培养基优化Escherichia coliO-acetyl-homoserineaspartate kinase I/homoserine dehydrogenase Ihomoserine acetyltransferasefermentation medium optimization
主题词
高丝氨酸(Homoserine)发酵(Fermentation)大肠杆菌(Escherichia coli)高丝氨酸脱氢酶(Homoserine Dehydrogenase)肿瘤转移(Neoplasm Metastasis)
栏目名称
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0310
发布时间
2017-09-26
基金项目
天津市高层次创新创业团队 - 微生物细胞工厂设计创新团队,中国科学院重点部署项目（ZDRW-ZS-2016-2）
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