摘要胚胎发育晚期丰富蛋白(Late embryogenesis abundant protein,LEA protein)是一类参与植物抗逆性应答的亲水蛋白.旨在揭示异源表达LEA蛋白在非生物胁迫条件下对宿主的保护作用.从蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)幼苗中克隆到一个编码LEA_5蛋白的基因,命名为MtLEA5B,通过半定量RT-PCR分析MtLEA5B的表达模式.利用SDS-PAGE蛋白电泳检测重组蛋白的耐热性和可溶性.构建原核表达载体,转化大肠杆菌过表达,检测大肠杆菌的生长存活情况.MtLEA5B的表达模式受到低温(4℃)、脱水、150 mmol/L NaC1胁迫和ABA处理的调控.SDS-PAGE蛋白电泳出现一条相比理论预测值较大,且沸水条件下可溶性未降低的条带.在大肠杆菌中过表达MtLEA5B蛋白能明显提升宿主茵在高温(55℃)和冷冻(-20℃)条件下的生存率.MtLEA5B是诱导性表达基因;MtLEA5B蛋白具有较高的亲水性和耐热性.在大肠杆菌中过表达可以明显提升其对温度胁迫的耐受性.
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