抗鳞翅目害虫基因cry1C的抗原表位分析及多克隆抗体制备
Antigenic Epitope Analysis and Preparation of Polyclonal Antibody of Lepidopteran Pest-resistant Gene cry1C
摘要利用生物信息学方法预测cry1C蛋白的抗原表位区,并命名为△cry1C.优化△cry1C的核苷酸序列并进行人工合成,构建重组表达载体pET28b(+)-△cry1C.在E.coli中诱导表达His6-△cry1C蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,分离、纯化获得cry1C多抗血清.ELISA测定结果表明,抗体效价最高可达1∶512 000.Western Blot分析结果表明,cry1C多克隆抗体能够与cry1C转基因抗虫水稻蛋白特异性结合.利用生物信息学筛选抗原表位区并优化序列、原核表达重组蛋白、免疫制备cry1C多克隆抗体,为深入研究抗鳞翅目害虫植物提供了前提条件.
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