换一批
换一批苏云金芽胞杆菌aiiA的5'端侧翼序列的克隆与功能鉴定
Cloning and Functional Identification of the 5'flanking Region of the aiiA Gene from Bacillus thuringiensis
摘要为了研究苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine Lactonase,AiiA 蛋白)表达调控机制,确定aiiA的启动子区域.本研究克隆了aiiA的5'端侧翼区(aP.1930-1),以fp作为报告基因,分段克隆aiiA的5'侧翼区,鉴定启动子活性,并对aiiA启动子序列中的碱基对-150和-142之间的2个连续的TATA盒进行定点突变.结果显示,侧翼序列aP.295-101和aP-295-1可作为启动子,实现GFP在大肠杆菌中的异源表达,启动子序列aP-295-.101比aP-295-1活性更强,aP-1o1-1序列不能启动GFP表达.定点突变pET28a-aP.295.-1o1-gfp载体2个TATA盒显著降低GFP表达.表明-295--1bp为aiiA的启动子区,-429-296与-100-1序列是aiiA的负调控序列.-150--142 bp区域的2个TATA盒对aiiA的5'侧翼区域的启动子活性起关键的作用.
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栏目名称
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0439
发布时间
2019-01-09
基金项目
国家自然科学基金项目（31201574）；
福建省教育厅资助项目（JK2012009）
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