换一批人参thionins的克隆、原核表达和活性研究
Cloning,Prokaryotic Expression and Activity Research of Panax ginseng Thionins
摘要抗菌肽在人参的生长过程中发挥了抑菌抗逆等重要作用.通过研究人参硫堇蛋白(Thionins)的抗菌活性,为未来进行大规模生产和生物农药研究奠定基础.分析人参thionins序列,构建原核表达质粒,诱导蛋白表达,对包涵体进行亲和纯化,使用纸片扩散法和质膜通透性实验检测纯化蛋白的抗菌活性.人参thionins长度为228 bp,编码75个氨基酸,选取其成熟肽区域(29-75 aa)进行后续的表达和纯化.成功构建了原核表达质粒pGEX-4T1-thionins,在大肠杆菌BL21中获得目的蛋白的高效表达,通过包涵体纯化获得目的蛋白,并进行复性和浓缩.人参硫堇蛋白在3和9μmol/L的浓度下,对黑斑病菌丝的生长抑制率分别为36.0％ 和51.1％,对黑斑孢子的半数抑制浓度为0.87μmol/L.人参硫堇蛋白具有显著抑制人参黑斑病真菌的活性的作用.
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栏目名称
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0702
发布时间
2019-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
吉林省教育厅"十三五"科学技术项目（(JJKH20181265KJ)）
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