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基于液氮研磨法的流式细胞术检测马铃薯倍性的研究

Study on the Identification of Potato Ploidy Using Flow Cytometry Based on Liquid Nitrogen Grinding Method

摘要染色体组倍性鉴定是马铃薯种质资源评价的重要内容,流式细胞仪能够快速、准确地对细胞核DNA含量进行测定,从而广泛用于检测植物染色体组倍性.建立适于马铃薯倍性鉴定的高通量流式细胞术体系,对马铃薯育种工作提供依据.以20份马铃薯合作88孤雌诱导后代为材料,用液氮研磨法制备叶片细胞核悬液,并将其与传统刀片切碎法制备的细胞核悬液进行比较,对已知四倍体马铃薯合作88和二倍体马铃薯IVP101进行染色体倍性测定,结果发现这两种方法在倍性测定结果之间无明显差异,但是液氮研磨法操作简单、耗时少.基于液氮研磨法的流式细胞术可快速、准确检测其倍性.另外,在液氮研磨法中,对细胞核悬液染色时间的长短(从15 min到12 h)并不会影响倍性测定结果,从而方便研究人员在实际操作中灵活选择染色时间.

作者 郑英转 ^[1] 吕燕 ^[2] 杨东旭 ^[3] 李国威 ^[3] 王洪洋 ^[2] 李灿辉 ^[2] 学术成果认领

作者单位云南师范大学云南省马铃薯生物学重点实验室,昆明 650500;云南师范大学云南省高校马铃薯生物学重点实验室,昆明 650500;云南师范大学生命科学学院,昆明 650500;甘肃省礼县三峪乡九年制学校,陇南 742219 ^[1] 云南师范大学云南省马铃薯生物学重点实验室,昆明 650500;云南师范大学云南省高校马铃薯生物学重点实验室,昆明 650500 ^[2] 云南师范大学生命科学学院,昆明 650500 ^[3]

关键词液氮研磨法马铃薯倍性鉴定流式细胞术

栏目名称

技术与方法

DOI 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2020-0478

发布时间 2021-01-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（31800134）云南省应用基础研究计划（2019FB023）农业部科技教育司（091720603010001002）