换一批摘要[目的]为了应对日益增加的大规模遗传材料鉴定需求,急需建立一种快速、简易、高效、低成本的基因组DNA提取方法.[方法]根据水稻遗传鉴定的特点,对传统TPS法进行改进和简化.(1)将特制的钢珠加样条与全自动研磨仪结合使用,提高了研磨水稻叶片组织的速度;(2)使用TPS缓冲液室温研磨裂解,无需液氮冷冻研磨;(3)研磨后的组织匀浆仅需75℃水浴20 min即可完成裂解;(4)室温静置5 min后吸取粗提液上清5μL至96孔PCR板内,使用排枪加入95μL灭菌的去离子水进行稀释,即完成基因组DNA的提取过程.[结果]简易TPS法提取基因组DNA的步骤减少至6步以内,省略了DNA沉淀、离心、洗涤、溶解等过程.提取过程简单、快速,可在30 min内完成96个样本的DNA提取.提取过程中使用的试剂种类较少且廉价易得、安全环保.通过优化DNA提取液的用量,用简易TPS法提取的基因组DNA开展的各类常规分子遗传鉴定的效果与CTAB法及传统TPS法相当.[结论]简易TPS法提高了水稻基因组DNA提取的效率,适合高通量的遗传鉴定.
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关键词
水稻叶片基因组DNACTAB法传统TPS法简易TPS法rice leafgenome DNACTAB methodtraditional TPS methodsimplified TPS method
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DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2024-0796
发布时间
2025-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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