'金小童'大白菜BrcGASA3基因在盐碱胁迫下的表达分析及抗性鉴定
Expression Analysis and Resistance Identification of BrcGASA3 in Chinese Cabbage'Jinxiaotong'Cultivar under Saline-alkali Stress
摘要[目的]对不同盐碱胁迫处理下耐盐碱性不同的大白菜(Brassica rapa ssp.pekinensis)品种中BrcGASA3的表达响应模式进行分析,对耐盐碱性相对较强的'金小童'品种大白菜中BrcGASA3进行克隆,并在模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)中进行遗传转化以鉴定BrcGASA3的盐碱胁迫响应特性.[方法]利用实时荧光定量PCR对盐碱耐性不同的大白菜品种在不同浓度NaCl和Na2CO3 处理过程中BrcGASA3的表达模式进行检测;对'金小童'品种大白菜中BrcGASA3的编码序列进行克隆;构建BrcGASA3过表达转基因拟南芥并进行盐碱胁迫处理,观察植株表型并进行生理生化指标测定及分析.[结果]在NaCl处理中,较低浓度处理时耐盐性较高的大白菜中BrcGASA3表达量较高,较高浓度处理时耐盐性较低的大白菜中BrcGASA3表达量较高;在Na2CO3处理中,低浓度处理下两种大白菜中BrcGASA3表达量差异相对较小,高浓度处理下耐盐性较高的大白菜中BrcGASA3表达量显著高于耐盐性较低的大白菜;成功克隆获得'金小童'大白菜中BrcGASA3的编码序列并构建了多个BrcGASA3过表达转基因拟南芥纯合体株系,发现在NaCl和Na2CO3处理下BrcGASA3过表达转基因拟南芥显示出低于野生型拟南芥的胁迫耐性;测定出在不同浓度NaCl和Na2CO3处理下BrcGASA3过表达转基因拟南芥和野生型拟南芥的渗透调节物质的含量、丙二醛含量、叶绿素含量等生理生化指标,初步阐释了过表达BrcGASA3降低拟南芥植株盐碱胁迫耐性的生理响应情况.[结论]在抗盐碱性不同的大白菜品种中BrcGASA3在不同程度盐碱胁迫处理下的表达响应方式不同,BrcGASA3在拟南芥中过表达降低了植株在盐碱胁迫处理下的生长能力.
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