换一批优化sgRNA提高塔宾曲霉基因编辑效率
Improving the Efficiency of Gene Editing by Optimizing sgRNA in Aspergillus tubingensis
摘要[目的]在CRISPR/Cas9基因编辑系统中,sgRNA是重要的基因编辑元件之一,它与Cas9蛋白结合并通过间隔区序列与基因组DNA互补,引导Cas9蛋白对基因组进行精准剪切.为了提高塔宾曲霉的基因编辑效率,对sgRNA进行优化是一项可行的策略.[方法]对sgRNA的启动子和发夹结构进行了优化,并在塔宾曲霉中进行了基因编辑效率的验证.[结果]通过RNP法进行基因编辑时,带有"lock"结构的sgRNA的基因编辑效率比对照组提高了9.37%;sgRNA在进行体内表达时,使用tRNAGly15和tRNAGly17启动子的基因编辑效率分别高出5S rRNA启动子14%-16%;使用tRNAGly15启动子表达带有"lock"结构的sgRNA,能提高白孢率,并使塔宾曲霉的基因编辑效率提高到96%.[结论]"lock"结构和两种tRNAGly15和tRNA Gly17启动子能够提高塔宾曲霉的基因编辑效率.
更多相关知识
栏目名称
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2024-0784
发布时间
2025-03-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点研发计划（2021YFC2100204）
现代农业产业技术体系（CARS-41）
- 浏览5
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
