文心兰'金辉'和'香水文心'花香形成比较分析
Comparative Analysis of Floral Scent Formation between'Jinhui'and Onc.'Sharry Baby'of Oncidium hybridum
摘要[目的]从南茜组培苗中选育出新株系'金辉',株型高大,花枝挺立,但无香气.通过解析无香'金辉'和浓香'香水文心'花香形成的分子机制,探索'金辉'无香气制约因素,以期通过分子技术使'金辉'释放香气.[方法]通过顶空-固相微萃取气相色谱法(HS-SPME)/GC-MS测定文心兰2个品种香气成分及含量.以'金辉'和'香水文心'不同发育时期花为材料,通过转录组测序和荧光定量PCR验证,筛选花香形成关键基因.[结果]气相色谱-质谱分析表明,'香水文心'盛花期花香挥发物总含量显著高于'金辉',是'金辉'的6.1倍,'香水文心'花香挥发物以单萜为主,'金辉'花香挥发物以倍半萜为主.转录组测序结果表明,共获得55 277个unigenes,大约81.64%的unigenes被公共数据库注释.单萜形成的上游途径,MEP途径中,多数基因,如CMK、HDR、HDS、GPPS等在'香水文心'中表达高于'金辉',使生成单萜的前体物质GPP在'香水文心'中积累.倍半萜形成的上游途径,MVA途径中,约一半基因在'香水文心'中略高表达,一半基因在'金辉'中略高表达.转录组数据中共筛选出3个显著差异表达的萜类合成酶基因(TPS).其中,OhTPS1和OhTPS2属于TPS-b家族,主要由单萜合成酶(mono-TPSs)基因组成.OhTPS1 和OhTPS2在'香水文兰'中表达显著高于'金辉'中,且在'香水文心'中随着花的发育逐渐升高,表明这2个基因在'香水文心'单萜生物合成中起关键作用.OhTPS3属于TPS-a家族,主要由倍半萜合成酶(sesqui-TPSs)基因组成.OhTPS3 在'金辉'中表达显著高于'香水文心'中,且在'金辉'中随着花的发育逐渐升高,表明这个基因在'金辉'倍半萜生物合成中起关键作用.[结论]'金辉'花香挥发物总量低的主要原因是MEP途径多数关键基因低表达,一定程度限制代谢流向单萜前体物质GPP积累,同时单萜合成酶基因的低表达,也一定程度阻碍单帖挥发物的生成.
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