换一批蒺藜苜蓿bZIP转录因子MtbZIP29的克隆及功能分析
Cloning and Functional Analysis of a bZIP Transcription Factor MtbZIP29 from Medicago truncatula
摘要[目的]克隆蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)MtbZIP29基因,研究bZIP29转录因子转录自激活、亚细胞定位及表达特征等,为后续阐明MtbZIP29基因参与蒺藜苜蓿生长发育、内源激素信号转导提供一定的理论研究基础.[方法]从野生型苜蓿'R108'中克隆MtbZIP29基因,构建试验所需的表达载体,通过瞬时表达融合蛋白观察其亚细胞定位,利用酵母表达分析其自激活活性;对MtbZIP29基因进行生物信息学分析,包括蛋白质理化性质、启动子顺式作用元件、蛋白质结构等;利用RT-qPCR方法对不同组织中及不同激素(ABA、SA、6-BA、IAA、MeJA)处理条件下的MtbZIP29进行表达分析;利用农杆菌介导法,获得转基因烟草植株,分析MtbZIP29的功能.[结果]成功克隆MtbZIP29基因,基因编码区全长1 518 bp,编码506个氨基酸,分子量55.830 kD,理论等电点为6.82,不稳定系数63.60,为不稳定亲水性蛋白;二级结构预测α螺旋占比25.89%,延伸链为0.59%,无规则卷曲为73.52%;亚细胞定位结果表明,该蛋白定位于细胞核;酵母实验表明,该基因编码蛋白具有转录自激活活性;表达特征分析显示,MtbZIP29基因在叶片中的表达水平最高,而茎和荚果中的表达水平明显低于其他组织,同时MtbZIP29基因的表达水平明显受到不同激素处理的影响.对转基因和野生型植株对比发现,转基因烟草的根系更加发达,同时根茎处具有明显的膨大.[结论]MtbZIP29基因参与根系生长发育,对不同激素均有响应,可能通过整合激素信号参与植物根系形态建成及逆境适应性的调控过程.
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关键词
蒺藜苜蓿MtbZIP29转录因子表达特征自激活细胞核定位烟草农杆菌转化启动子分析Medicago truncatulaMtbZIP transcription factorexpression patternself-activationnuclear localizationtobaccoagrobacterium transformationpromoter analysis
栏目名称
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2025-0482
发布时间
2026-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
内蒙古自治区科技厅内蒙古自治区科技重大专项项目（2022JBGS00160302）
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