摘要[目的]水稻粉质胚乳突变体因淀粉或蛋白合成、积累异常呈现粉质不透明表型,是研究胚乳发育及调控网络的理想材料.本研究旨在解析粉质胚乳突变体M97的籽粒表型特征并定位其突变基因.[方法]采用扫描电镜、荧光辅助毛细管电泳、X射线粉末衍射仪和快速黏度分析仪等技术,分析M97的淀粉颗粒形态、链长分布及理化特性;通过MutMap方法结合SNP/Indel过滤进行突变基因定位.[结果]野生型Kitaake籽粒断面透明,M97胚乳中心粉质不透明、四周透明.M97的粒长、粒宽、粒厚显著小于野生型,导致百粒重下降.扫描电镜显示,M97胚乳中心淀粉颗粒疏松、间隙大,四周区域则与野生型相似,颗粒排列紧密呈规则多角形.与野生型相比,M97总淀粉含量显著降低,可溶性糖显著升高,表观直链淀粉显著降低.两者淀粉均为A型晶体,但M97相对结晶度显著升高;其淀粉膨胀势升高,水溶性显著降低,峰值黏度和崩解值升高,热浆黏度和终止黏度降低.MutMap将突变基因定位于2号染色体,M97中BT1基因第3外显子存在T到C的替换,导致第322位异亮氨酸变为苏氨酸.KASP标记检测证实该突变与粉质表型共分离.M97被替换的异亮氨酸在各物种BT1同源蛋白中高度保守.[结论]鉴定出BT1基因新等位突变体,明确单氨基酸替换对水稻胚乳形态和淀粉特性的影响,为解析BT1调控淀粉合成的分子机制奠定基础,也为稻米品质改良提供理论参考.
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