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利用酵母双杂交技术筛选与hPOT1相互作用的新蛋白

Screening the Novel Interacting Proteins of hPOT1 by Yeast Two- Hybrid System

摘要目的:利用酵母双杂交系统筛选与人POT1(human protection of telomeres 1,hPOT1)相互作用的蛋白.方法:以hPOT1的300~634氨基酸片段为诱饵,在人乳腺cDNA文库中筛选能与hPOT1相互作用的蛋白质;运用营养缺陷型培养基和X-α-Gal实验排除假阳性,并对阳性克隆进行序列测定和比对.结果:经过酵母双杂交筛选,发现7个与hPOT1相互作用的蛋白;选取NM23B与hPOT1通过GST-pull down和免疫共沉淀进行进一步的验证,结果证明它们确实存在相互作用.结论:hPOT1能与NM23B发生相互作用,在此实验基础上可以进一步研究NM23B与hPOT1相互作用的生物学意义.

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DOI 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.03.016
发布时间 2011-09-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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