换一批
换一批摘要目的：克隆表达肺炎支原体黏附蛋白P30，为临床诊断试剂和疫苗研制打下基础。方法：采用大肠杆菌优势密码子设计P30蛋白优化基因序列，采用Genscript软件评价设计基因的密码子适应指数（CAI），并利用载体pBVIL1实现P30优势表位基因在大肠杆菌中的表达，采用ELISA法对纯化的P30抗原活性进行测定。结果：野生P30基因的CAI为0.59，优化P30基因的CAI为0.84；在大肠杆菌中表达的IL1-P30融合蛋白的相对分子质量为43.5×103，纯化后的重组抗原能与肺炎支原体感染者血清发生特异性免疫反应，灵敏度和特异性分别为82.35%和89.36%，ROC曲线下面积为0.9088。结论：采用密码子优化技术实现了肺炎支原体黏附蛋白P30在大肠杆菌中的高效表达，获得的重组P30蛋白具有很好的抗原性，可用于肺炎支原体诊断试剂的研究。
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关键词
肺炎支原体P30黏附蛋白优势密码子原核表达Mycoplasma pneumoniaeP30 adhesion proteincodon optimizationprokaryotic expression
分类号
Q78
栏目名称
研究报告
DOI
10.3969/j.issn.1009-0002.2014.06.016
发布时间
2015-01-15
基金项目
国家重大科技专项
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