中东呼吸综合征冠状病毒S1蛋白在昆虫细胞中的重组表达及免疫效果评价

Preparation and Immunization Assessment of Recombinant MERS-CoV S1 Protein Expressed by Insect Cells

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摘要目的：利用昆虫杆状病毒表达系统重组表达中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）S1蛋白，并对其免疫效果进行评价。方法：构建含有MERS-CoV S1基因的重组杆状病毒质粒，转染Sf9细胞包装杆状病毒；重组病毒传代3次获得种子病毒，感染Sf9细胞，收获感染上清，通过镍离子亲和层析纯化获得S1重组蛋白；用纯化的S1蛋白免疫BALB/c小鼠，采用ELISA检测免疫小鼠血清抗原特异性的抗体水平；采用假病毒中和试验检测血清中抗体的中和活性。结果：获得了表达MERS-CoV S1蛋白的重组病毒株，在昆虫细胞中表达并纯化了S1重组蛋白；利用重组表达的S1蛋白免疫小鼠3次，血清S1特异性IgG抗体滴度可达1∶102400，免疫小鼠血清稀释至1/5120后中和百分比仍达50%以上。结论：利用昆虫细胞重组表达的MERS-CoV S1蛋白具有良好的免疫原性，并能有效诱导产生高滴度中和抗体，为发展MERS-CoV重组蛋白疫苗奠定了基础。