换一批摘要目的:表达A型肉毒毒素(BoNT/A)中和抗体3D12.方法:按哺乳动物偏好密码子设计合成3D12轻链(L)和重链(H)编码序列,分别连入L293、H293表达载体,共转染至HEK293细胞进行瞬时表达并纯化;通过ELISA检测3D12效价、3D12与BoNT/A受体的竞争结合作用及与BoNT/AHc的亲和力常数,通过Western印迹鉴定3D12的特异性.结果:得到轻链(L293-L)及重链(H293-H)表达载体;瞬时表达并纯化得到抗体3D12;ELISA结果显示3D12效价为1.22× 106,3D12与BoNT/A受体FGFR3、SV2C之间不存在竞争结合作用,3D12的亲和力常数K=10.6×108 L/mol;Western印迹显示3D12与BoNT/AHc能够特异性结合.结论:得到A型肉毒毒素中和抗体3D12,为肉毒毒素中和抗体的开发及阐明中和抗体的表位奠定了基础.
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关键词
A型肉毒毒素中和抗体3D12HEK293细胞瞬时表达botulinum neurotoxin serotype Aneutralizing antibody3D12HEK293 cellstransient expression
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1009-0002.2016.03.009
发布时间
2016-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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