换一批
换一批可溶性泛素样特异性蛋白酶1的表达及活性鉴定
Souble Expression and Biological Activity Identification of Ubiquitin-Like Specific Protease 1
摘要目的:高效可溶性表达泛素样特异性蛋白酶1(ULP1).方法:根据大肠杆菌密码子的偏好性优化合成编码ULP1的基因片段序列,将其克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),用0.5 mmol/L IPTG于37℃诱导表达8h,观察重组蛋白ULP1的表达情况;优化诱导时间及IPTG浓度,并鉴定重组蛋白ULP1的生物学活性.结果:重组蛋白ULP1表达的最佳条件为37℃、0.1 mmol/L的IPTG诱导表达5h,目的蛋白以可溶性表达为主;Western印迹结果表明,重组蛋白ULP1能够被His单克隆抗体识别,重组蛋白ULP1能够特异性酶切SUMO-GFP.结论:表达了具有生物学活性的SUMO蛋白酶ULP1.
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关键词
泛素样特异性蛋白酶1(ULP1)SUMO蛋白酶表达纯化生物学活性ubiquitin-like specific protease 1(ULP1)SUMO proteaseexpressionpurificationbiological activity
分类号
Q786
栏目名称
研究报告
DOI
10.3969/j.issn.1009-0002.2017.05.011
发布时间
2018-07-11
基金项目
国家自然科学基金
山东省自然科学基金
河南省农业科学院高层次人才科研启动项目
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