换一批
换一批利用GUS基因瞬时表达对大豆子叶节和胚尖转化方法的比较及优化
Comparison and Optimization of Transformation Metods in Soybean Cotyledonary Node and Embryonic Tip Via GUS Transient Expression Assay
摘要建立了一个综合利用CaMV 35S::GUS基因的瞬时表达水平、表达位点和表达率来评价大豆转化效率的检测体系.并利用该体系对分别以栽培大豆(Gjycine max L.)"科丰6号"、"合丰35"、"中黄13"和"垦农18"的子叶节和胚尖为外植体的农杆茵介导的2种不同转化方法进行了比较和优化.实验结果表明.不同的转化方法对大豆的品种要求不同,"科丰6号"和"合丰35"2个品种适合子叶节转化法.而"中黄13"更适于胚尖转化法.大豆萌发培养基和共培养基对转化频率的影响存在交互作用.低6-BA的萌发培养基和高6一BA的共培养基配合、或者高6-BA的萌发培养基和低6-BA的共培养基配合使用适合"科丰6号"子叶节转化法.而"中黄13"胚尖转化法要求萌发培养基和共培养基中的6-BA浓度都较高.另外,在子叶节转化系统中,6 d苗龄的子叶节共培养3 d GUS基因的瞬时表达率较高,而在胚尖转化系统中大豆的萌发时间对Gus基因的瞬时表达率并没有显著的影响,胚尖与农杆茵共培养较宜的时间为5 d.
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分类号
Q943.2
栏目名称
实验与技术
DOI
10.3969/j.issn.0006-3193.2008.12.014
发布时间
2009-04-08
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)
国家自然科学基金
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